A sejttenyésztési kísérletekben a pipettákat nagyon gyakran használják, és működésének pontossága közvetlenül befolyásolja a kísérleti eredmények megbízhatóságát és megismételhetőségét. Az alábbiakban bemutatunk néhány tippet a pipetta működéséhez a sejttenyészetben, amelyek remélem, hogy hasznosak lesznek a kísérlethez.
1. Válassza ki a megfelelő pipettát és a tippet
- Pipetta kiválasztása: Válassza ki a jobb pipettát az átvitelre kerülő folyadékmennyiség szerint. A legtöbb pipetta normál működési térfogattartománya a megadott tartomány 10-100%. Próbálja meg elkerülni a pipetta mennyiségének beállítását a maximális mennyiség kevesebb mint 10% -ára, és használjon egy kis hatótávolságú pipettát a kis térfogatú pipettázási műveletekhez.
. Ezenkívül specifikus kísérletekhez (például aszeptikus művelet) ki kell választani az autoklávozott tippeket.
2. Öblítse le a tippet
Öblítse le a 2-3 tippet, hogy homogén filmet képezzen a csúcsban, ezáltal javítva a pipettázás pontosságát. Ezenkívül semlegesítheti a kapilláris hatást a mikropipettákban, ami a csúcson belüli hőmérsékletet összhangban lehet a minta hőmérsékletével a nagy térfogat-pipettázáshoz. Meg kell jegyezni, hogy az öblítés káros hatással lehet az eredményekre a meleg és hideg megoldások pipettázásakor.
3. Ellenőrizze az aspiráció és az adagolás sebességét
. Ez elkerülheti a buborékok kialakulását és javíthatja a pipettázás pontosságát.
- Szünet: A folyadék szívása után hagyja körülbelül 1 másodpercig a folyadékot a folyadékban, különösen a viszkózus folyadékok esetében. Azonnal kihúzva a csúcsot hiányos folyékony törekvéshez vezethet.
4. Vigyázzon a hegy merülő mélységére
- Mikropipett: A csúcsot el kell meríteni 2-3 mm.
- Nagy hatótávolságú pipetta: A merítés mélységének 5-6 mm-nek kell lennie. Ha a hegyet túl mélyre merítik, a hegy belsejében levő levegőt összenyomják, ami túl sok folyadék szívást okozhat. A hegy felületén maradt folyadék szintén befolyásolhatja az eredményeket.
5. Függőleges működés
Merítse el a pipettát a mintába a lehető legeretikusan, lehetőleg anélkül, hogy a függőleges helyzetből több mint 20 fokos. A pipettás térfogatának pontosságának javítása mellett ez megakadályozhatja a folyadékot a pipettába történő áramlás is a túlzott döntés miatt.
6. Figyelje meg a pipett tippet
A folyadék kiürítésére való felkészülés során figyeljen arra, hogy vannak -e felesleges cseppek a pipetta hegyének felületéhez. A folyadék kibocsátása után a pipettappályának hegyét a tartály oldalára lehet megérinteni, hogy a kisülés elég alapos legyen, hogy megakadályozzák az utolsó folyadékcsepp maradványát a pipetta hegyének hegyére.
7. Válassza ki a megfelelő pipettázási módszert
- Pozitív szívási módszer: A legtöbb folyadékhoz alkalmas. A folyadék szopásakor nyomja meg a gombot az első leállási ponthoz, majd lassan engedje el a gombot, hogy visszatérjen a kiindulási ponthoz. Ezután nyomja meg a gombot az első ütközőponthoz, hogy a folyadékot kiürítse, szünetet tartson egy ideig, és folytassa a gombot a második stop ponthoz, hogy kiszabadítsa a fennmaradó folyadékot. Végül engedje el a gombot.
- Hátrányos szívási módszer: Nagyon viszkózus folyadékokhoz, biológiailag aktív folyadékokhoz, könnyen habzó folyadékokhoz vagy rendkívül kis mennyiségű folyadékhoz. Először szopjon folyékonyabban, mint a beállított tartomány, és ne fújja ki a fennmaradó folyadékot a folyadék átvitelekor.
8. Tartsa tisztán és karbantartsa a pipettát
- Rendszeres kalibrálás: A pipetta egy ideig történő használata után azt kell kalibrálni annak pontosságának biztosítása érdekében.
- Tisztítás: Minden felhasználás után a pipettát időben meg kell tisztítani, hogy elkerülje a maradék folyadékot a következő kísérlet szennyeződésétől.
9. aszeptikus művelet
A sejttenyészetben az aszeptikus művelet nagyon fontos. Pipetta használatakor figyeljen a következő pontokra:
- Fertőtlenítés: Használat előtt törölje le a pipettát és a hegyet alkohol pamutgolyóval fertőtlenítés céljából.
- Kerülje a keresztszennyeződést: Használjon új tippet minden mintához a keresztszennyezés elkerülése érdekében.
A fenti tippekkel pontosabban és hatékonyabban használhatja a sejttenyészet kísérleteihez pipettákat, és javíthatja a kísérleti eredmények megbízhatóságát és megismételhetőségét. Remélem, hogy ezek a tippek segítenek!