A kémiában, a biológiában és az orvostudományban a pipetta egy tipikus laboratóriumi műszer, amelyet előre meghatározott mennyiségű folyadék adagolására használnak, gyakran médiaadagolóként. A pipettázási eredmények sikere attól függ, hogy milyen pontosan olvassa le a pipetta térfogatát, amikor kényes vizsgálatokat végez. Pontos, jó minőségű műszerek használata a legjobb módja annak, hogy a pipettatérfogatokat megfelelően leolvassák. Mivel a pontossággal és precizitással kapcsolatos laboratóriumi követelmények folyamatosan nőnek, az ideális pipettázási technikák megértése és tökéletesítése kritikus fontosságú.
A pipettákat tudományos kutatásban használják, és nagy pontosságot igényelnek kis mennyiségű folyadék helyes méréséhez és átviteléhez.
Azonban a berendezés meghibásodása vagy a kezelő hibája okozhatja a pipetta mérési hibákat. Az adagolt térfogatban bekövetkezett bármilyen változás hatással lehet a kísérletek eredményeire és reprodukálhatóságára, például a qPCR-re.
A pipetta pontosságát befolyásoló tényezők:
Hőfok
A pontos pipettázást nagyban befolyásolja a hőmérséklet. Az adagolóeszköz és a folyadék közötti hőmérséklet-különbség a leginkább befolyásoló tényező. A hőtágulás esetspecifikus hatásai a folyadékfelület és a dugattyú közötti légrésben (holt levegőtérfogatban) jelentkeznek. Ez többek között csökkentheti vagy növelheti a hegybe szívott folyadék mennyiségét.
Sűrűség
A hegybe szívott folyadék mennyiségét a sűrűség (tömeg/térfogat arány) befolyásolja. Kevésbé sűrűbb folyadékot szívnak fel, mint egy hasonló, vízzel történő eljárással. A kevésbé sűrű folyadékok esetében az eredmények ellentétesek. Ezt a rugalmas holt levegő térfogata és a Föld gravitációja okozza. A folyadék sűrűsége is változik a hőmérséklettel. Jellemzően a folyadék sűrűsége is változik a hőmérséklettel. 20 fok /68 °F hőmérsékleten a víz sűrűsége jellemzően 0,998 kg/dm3, az etanol sűrűsége 0,79 kg/dm3, a kénsavé (95-98%) h2SO4) sűrűsége 1,84 kg/dm3.
Magas
A pontosságot a légnyomás és a földrajzi magasság befolyásolja. Minél nagyobb a tengerszint feletti magasság, annál alacsonyabb a légnyomás, és annál alacsonyabb a konverziós tényező.
Ezenkívül egyes folyadékok forráspontja jelentősen leesik a szobahőmérséklet közelébe, ami jelentősen megnöveli a párolgási veszteséget.
A reagens elpárologtatása
Az erősen illékony reagensek elnyelik a gőzt, amely belép a csúcsba, és megnöveli a belső nyomást. Ezért hibák lépnek fel, amikor a folyadékot a megnövekedett nyomás miatt kinyomják.
Nem megfelelő pipettázási mód lett kiválasztva
A pipettázás során a kezelők gyakran véletlenszerű vagy szubjektív döntéseket hoznak arról, hogy hátra vagy előre módot használjanak-e. Azonban a viszkózus minták az egyetlenek, amelyek fordított üzemmódot használnak. Fordított módban a dugattyú teljesen be van nyomva (az első ütközőn túl) a minta leszívásához, majd csak részben van lenyomva (az első ütközőig) a minta leadásához. Emiatt viszkózus folyadékok esetén az előremenő üzemmód használata alulszállítást, míg a fordított mód használata vizes oldatoknál túlszállítást eredményez.
Dönthető pipettázás
A mintaveszteség akkor következik be, amikor a pipetta hegye a tartály falához ér a szívás során. Ezenkívül kis térfogatok pipettázásakor a pipetta ferdén történő visszahúzása térfogatváltozásokat okozhat a felületi feszültség miatt. A pipetta közvetlenül a tartályból való kihúzása csökkenti a hibákat.